خصوصیات عملکردی دو جهش نادرست RAB27A یافت شده در سندرم گریسلی نوع 2
چکیده
سندرم گریسلی انسانی نوع 2 (GS-2) با آلبینیسم جزئی و یک اختلال شدید ایمونولوژیک در نتیجه جهش RAB27A مشخص می شود. در ملانوسیت ها، Rab27A یک کمپلکس سه جانبه با یک عامل خاص Slac2-a/melanophilin و میوزین Va تشکیل می دهد و این کمپلکس حمل و نقل ملانوزوم را تنظیم می کند. در اینجا، ما یک جهش جدید هموزیگوت نادرست Rab27A، یعنی K22R، در یک بیمار فارسی GS-2 و نتایج تجزیه و تحلیل تاثیر جهش K22R و جهش I44T قبلا گزارش شده بر عملکرد پروتئین را گزارش میکنیم. هر دو جهش به طور کامل فعالیت اتصال Slac2-a/melanophilin را لغو می کنند، اما بر خواص بیوشیمیایی Rab27A تأثیر متفاوتی می گذارند. جهش Rab27A (K22R) فاقد توانایی اتصال GTP است و محلی سازی سیتوزولی را در ملانوسیت ها نشان می دهد. در مقابل، نه فعالیت ذاتی GTPase و نه محلیسازی ملانوزومی Rab27A تحت تأثیر جهش I44T قرار نمیگیرد، اما جهش Rab27A (I44T) قادر به استخدام Slac2-a/melanophilin نیست. جالب توجه است که این دو جهش به طور متفاوتی بر اتصال به سایر عوامل Rab27A، Slp2-a، Slp4-a/granuphilin-a و Munc13-4 تأثیر می گذارند. جهش Rab27A(K22R) به طور معمول به Munc13-4 متصل می شود، اما نه Slp2-a یا Slp4-a، در حالی که جهش Rab27A(I44T) فعالیت اتصال کمتری به Slp2-a و Munc13-4 نشان می دهد اما به طور معمول Slp4-a را متصل می کند.
Abstract
Human Griscelli syndrome type 2 (GS-2) is characterized by partial albinism and a severe immunologic disorder as a result of RAB27A mutations. In melanocytes, Rab27A forms a tripartite complex with a specific effector Slac2-a/melanophilin and myosin Va, and the complex regulates melanosome transport. Here, we report a novel homozygous missense mutation of Rab27A, i.e. K22R, in a Persian GS-2 patient and the results of analysis of the impact of the K22R mutation and the previously reported I44T mutation on protein function. Both mutations completely abolish Slac2-a/melanophilin binding activity but they affect the biochemical properties of Rab27A differently. The Rab27A(K22R) mutant lacks the GTP binding ability and exhibits cytosolic localization in melanocytes. By contrast, neither intrinsic GTPase activity nor melanosomal localization of Rab27A is affected by the I44T mutation, but the Rab27A(I44T) mutant is unable to recruit Slac2-a/melanophilin. Interestingly, the two mutations differently affect binding to other Rab27A effectors, Slp2-a, Slp4-a/granuphilin-a, and Munc13-4. The Rab27A(K22R) mutant normally binds Munc13-4, but not Slp2-a or Slp4-a, whereas the Rab27A(I44T) mutant shows reduced binding activity to Slp2-a and Munc13-4 but normally binds Slp4-a.
Click for read more.
