تشخیص مولکولی همزمان کلامیدیا تراکوماتیس و نایسریا گونوره‌آ در بیماران مبتلا به اورتریت با استفاده از PCR و Multiplex PCR

چکیده

عفونت‌های دستگاه ادراری–تناسلی از شایع‌ترین بیماری‌ها در میان افراد فعال از نظر جنسی به شمار می‌روند که نقش مهمی در بروز اورتریت دارند. در میان عوامل باکتریایی، نایسریا گونوره‌آ و کلامیدیا تراکوماتیس به‌عنوان دو پاتوژن اصلی شناخته می‌شوند. تشخیص سریع و دقیق این عوامل، نقش کلیدی در درمان مؤثر و پیشگیری از عوارض بعدی دارد. هدف از این مطالعه، بررسی کارایی روش PCR و Multiplex PCR در شناسایی همزمان این دو باکتری در نمونه‌های ادراری–تناسلی بیماران مبتلا به اورتریت بود.

در این مطالعه، ۶۷ بیمار مبتلا به اورتریت شامل ۶۲ مرد و ۵ زن مورد بررسی قرار گرفتند. علاوه بر نمونه‌برداری سوابی از ترشحات ابتدای مجرای ادرار جهت بررسی باکتریولوژیکی، ۱۰ تا ۱۵ میلی‌لیتر از ابتدای ادرار صبحگاهی بیماران جمع‌آوری شد. پس از استخراج DNA از نمونه‌های ادراری، واکنش PCR و Multiplex PCR انجام و محصولات حاصل با استفاده از ژل آگارز آنالیز شدند. همچنین کلیه نمونه‌ها بر روی محیط کشت اختصاصی نایسریا گونوره‌آ کشت داده شدند.

نتایج نشان داد که ۳۱ نمونه (۴۶٪) از نظر نایسریا گونوره‌آ و ۱۵ نمونه (۲۲/۴٪) از نظر کلامیدیا تراکوماتیس مثبت بودند. آلودگی همزمان با هر دو باکتری در ۷ نمونه (۱۰/۴٪) مشاهده شد. در حالی‌که کشت اختصاصی تنها در ۲۵ مورد (۳۷/۳٪) موفق به شناسایی نایسریا گونوره‌آ گردید. حساسیت و ویژگی روش Multiplex PCR در مقایسه با PCRهای جداگانه، ۱۰۰٪ گزارش شد.

یافته‌های این پژوهش نشان می‌دهد که روش Multiplex PCR یک روش غیرتهاجمی، سریع و بسیار دقیق برای تشخیص همزمان عوامل شایع اورتریت از نمونه ادرار بوده و می‌تواند جایگزین مناسبی برای روش‌های زمان‌بر کشت باشد.

4

Abstract

Urogenital tract infections are among the most common diseases in sexually active individuals, with Neisseria gonorrhoeae and Chlamydia trachomatis being the primary causative agents of urethritis. Rapid and accurate detection of these pathogens plays a crucial role in effective treatment and prevention of complications. This study aimed to evaluate the diagnostic performance of PCR and Multiplex PCR for simultaneous detection of these bacteria in urine samples of patients with urethritis.

In this study, 67 patients with urethritis, including 62 men and 5 women, were enrolled. In addition to urethral swab samples for bacteriological examination, 10–15 mL of first-void morning urine was collected from each patient. DNA was extracted from urine samples, followed by PCR and Multiplex PCR amplification, and products were analyzed using agarose gel electrophoresis. All samples were also cultured on selective media for N. gonorrhoeae.

The results showed that 31 samples (46%) were positive for N. gonorrhoeae and 15 samples (22.4%) for C. trachomatis. Co-infection with both pathogens was detected in 7 samples (10.4%). In contrast, culture detected N. gonorrhoeae in only 25 samples (37.3%). The sensitivity and specificity of Multiplex PCR compared to single PCR assays were both 100%.

These findings indicate that Multiplex PCR is a rapid, non-invasive, and highly sensitive method for the simultaneous detection of C. trachomatis and N. gonorrhoeae from urine samples.

4

💡 این مطالعه نشان می‌دهد که روش Multiplex PCR با دقت بالا و بدون نیاز به نمونه‌برداری تهاجمی، امکان تشخیص همزمان دو عامل اصلی اورتریت را فراهم کرده و می‌تواند تحول مهمی در تشخیص عفونت‌های ادراری–تناسلی ایجاد کند.

تشخیص مولکولی همزمان کلامیدیا تراکوماتیس و نایسریا گونوره‌آ در بیماران مبتلا به اورتریت